Validaciones ESAC-ECVAM. 21 de marzo de 2006
a) Estrategia de reducción de peces.
En la reunión del Comité Científico Asesor de ECVAM (ESAC) que tuvo lugar
en ISPRA, se aprobó por unanimidad la estrategia de reducción del numero
de peces en las valoraciones ecotoxicologicas de sustancias y preparados
químicos, conocida como el "Upper Threshold Concentration (UTC) approach".
La estrategia enunciada por Hutchinson y
colaboradores en 2003, para las valoraciones ecotoxicológicas de
medicamentos de uso humano, se presento al grupo de trabajo de expertos en
ecotoxicología del ECVAM constituido en julio de 2003. Como sugerencia de
dicho grupo de trabajo, la estrategia fue aplicada por personal científico
del ECVAM en colaboración con científicos del European Chemical Bureau (ECB-JRC)
sobre mas de 1000 sustancias químicas pertenecientes tanto al registro de
nuevas sustancias químicas (NDB), al registro de sustancias existentes (IUCLID)
asi como a un numero de sustancias activas incluidas dentro del registro
de plaguicidas (DG-Sanco), consiguiéndose una reducción comprendida entre
el 37- 52% en el no de peces.
El principio enunciado por Hutchinson y colaboradores es sencillo y
consiste en dividir la etapa de test básicos requeridos para determinar la
ecotoxicidad acuática en 2 fases. En la primera fase se determinarían la
L(E)C50 en el test de daphnia y alga. El test que resulte mas sensible, es
decir el valor de L(E)C 50 mas bajo se utilizaría para fijar la dosis mas
alta en la determinación de la LC50 en peces. En primer lugar se
realizaría un test con la concentración citada (UTC) y si no se observa
mortalidad se interrumpiría la valoración, adoptándose para su
clasificación y etiquetado el valor de dicha L(E)C50. En caso de
observarse mortalidad, se determinaría la LC50 en peces siguiendo la OECD
TG-203 o el Método C.1 descrito en el Anexo V de la Directiva 67/548/EEC.
La aprobación de esta estrategia representa un hito en la historia de las
3Rs pues es la primera vez que el ECVAM recomienda la adopción de un
método o estrategia dentro del ámbito de la ecotoxicología. Por otro lado,
y lo que es mas importante, la aprobación de dicha estrategia por las
autoridades legislativas comunitarias y posteriormente, su adopción por la
OCDE representara una drástica reducción en el numero de vertebrados en la
valoraciones de ecotoxicidad de cara a la Nueva Política Europea de
Sustancias Químicas (REACH)
Dra. Argelia Castaño Calvo
Presidenta del Panel de Revisión de la Estrategia UTC (ESAC)
Presidenta de REMA
b) Como alternativas de sustitución al ensayo en conejo de pirogenicidad mediada por endotoxinas de microorganismos Gram-negativo fueron validados por ECVAM en 2006 cinco ensayos in vitro:
1 liberación de IL-1 en sangre humana completa: http://ecvam.jrc.it/ft_doc/SOP WB-IL-1 fresh vials.pdf
2 IL-6 en sangre humana completa http://ecvam.jrc.it/ft_doc/SOP WB IL6.pdf
3 IL6 en Células Mononucleares de sangre periférica (PBMC) http://ecvam.jrc.it/ft_doc/SOP PBMC IL6_fresh.pdf
4 IL-6 en la linea celular monocítica humana MonoMac-6 (MM6) http://ecvam.jrc.it/ft_doc/SOP-MM6-IL6.pdf
5 IL-1 en sangre humana completa criopreservada.
c) El ensayo de formación de colonias de
granulocitos-monocitos CFU-GM fue validado por ECVAM en 2006
como una alternativa in vitro de sustitución del empleo de la segunda
especie animal (perro) para predecir la neutropenia humana aguda,
recomendando su empleo como complementario al ensayo de HTD en ratón.
http://ecvam-sis.jrc.it/IP1685/published/main_101.html